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產品名稱:

U266 人骨髓瘤細胞

產品型號: U266
產品時間: 2020-04-24
描述:U266 人骨髓瘤細胞介紹
該細胞來源於多發性骨髓瘤男性患者,表達IgG,分泌IL-6。
細胞特性
1) 來源:人骨髓
2) 形態:淋巴母細胞樣,懸浮生長
3) 含量:>1x106
4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

產品介紹

U266 人骨髓瘤細胞介紹

該細胞來源於多發性骨髓瘤男性患者,表達IgG,分泌IL-6。

細胞特性

1) 來源:人骨髓

2) 形態:淋巴母細胞樣,懸浮生長

3) 含量:>1x106

4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式

(1)幹冰運輸,收到後立即轉入液氮凍存或直接複蘇;

(2)存活細胞,收到後應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

(3)收到細胞後請拍照,3天內如果發現汙染,請及時拍照與绿巨人全网最好的破解app聚合平台聯係。

細胞用途:僅供科研使用。

細胞接收後的處理:

1) 收到細胞後,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有汙染,請拍照後及時聯係绿巨人全网无限播放。

2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售後時提供收到細胞時細胞狀態的依據。

3) 觀察好細胞狀態後,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h。

4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落後抱團生長,可將T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h,然後抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鍾,棄去上清重懸後接種到加有按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。

5) 懸浮細胞:T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h,然後抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鍾,棄去上清重懸後接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基)。

6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基來培養細胞。  收到細胞後di一次傳代建議1:2傳代 。

U266 人骨髓瘤細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備1640(推薦 iCell-128-0002 含NAHCO3  1.5g/L))培養基;優質胎牛血清,15%;雙抗,1%。(注意:該細胞培養PH值不超過7.0)。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:基礎培養基+20%FBS+8%DMSO (細胞培養級)。

二. 細胞處理:

1) 複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以後傳代比例可根據客戶需要自己決定。

對於懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基後,將剩餘細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下麵T25瓶為例;

1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數板計數。

2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加基礎培養基和血清重懸細胞,再加入DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為8%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置於程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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