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產品名稱:

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞

產品型號: CCC-HPF-1
產品時間: 2020-04-26
描述:CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞特性
1) 來源:肺
2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:1x10^6 個/mL
4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
6) 準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%.

產品介紹

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞特性

1) 來源:肺
2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式

(1)幹冰運輸,收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇;

(2)存活細胞,收到後應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

(3)收到細胞後請拍照,3天內如果發現汙染,請及時拍照與绿巨人全网无限播放聯係。
 
CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞用途:僅供科研使用。
 
接收後的處理:
1) 收到細胞後,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有汙染,請拍照後及時聯係绿巨人全网最好的破解app聚合平台。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售後時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3) 觀察好細胞狀態後,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落後抱團生長,可將T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h,然後抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鍾,棄去上清重懸後接種到加有按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置於37℃培養箱放置約2-3h,然後抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鍾,棄去上清重懸後接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基)。
6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的完全培養基來培養細胞。  收到細胞後di一次傳代建議1:2傳代 。
 
                       
細胞
培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量完全培養基終止消化。
3. 輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,加1-2mL培養液後吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下麵T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養基後,PBS清洗一遍後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置於程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

绿巨人破解版无敌版(上海)生物技術股份有限公司主要產品和技術服務:

一、原代細胞服務
       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
       原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等;
       原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;

二、細胞株/係服務
       細胞株/係培養、增殖、凍存和相關說明書;
       細胞係培養過程的技術指導;
       細胞係培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
       iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層在);
       iPS細胞增殖及冷凍保存;
       iPS基礎培養技術實習;
       新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他:根據客戶需要定製服務等

序號

產品名稱

貨號

規格

售價

備注

1

培養基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培養基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培養基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

內皮細胞培養基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

動物上皮細胞培養基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮細胞培養基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培養基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培養基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

馬血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片劑(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS雙抗(進口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 

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