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NCTC1469 小鼠正常肝細胞/绿巨人破解版在线观看(iCell)介紹
1952年建係,源於正常C3H/An小鼠的肝髒組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。
細胞特性
1)來源:小鼠的肝組織
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受後的處理:
1)收到細胞後,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給绿巨人破解版在线观看。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜並將T25瓶置於37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否汙染,若發現汙染或疑似汙染,請及時與绿巨人全网无限播放取得聯係。
細胞用途:僅供科研使用。
NCTC1469 小鼠正常肝細胞/绿巨人全网最好的破解app聚合平台(iCell)培養操作規程,供參考
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11995-065);馬血清,10%;雙抗1%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水麵要低於凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,加入1mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對於貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打後吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,加入1mL培養液後吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下麵T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基後,PBS清洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鍾去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO後迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大於1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置於程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞係服務:
細胞株/係培養、增殖、凍存和相關說明書
細胞係培養過程的技術指導
細胞係培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定製服務等
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