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產品名稱:

GES-1 人胃黏膜上皮細胞

產品型號: GES-1
產品時間: 2020-01-02
描述:GES-1 人胃黏膜上皮細胞描述

該細胞是從9個月的胎兒胃上皮細胞中培養分離出來,經過SV40病毒轉染後,篩選獲得。不能在裸鼠中成瘤,是在研究人胃腫瘤過程中一種重要的模式係統。

產品介紹

GES-1 人胃黏膜上皮細胞描述

該細胞是從9個月的胎兒胃上皮細胞中培養分離出來,經過SV40病毒轉染後,篩選獲得。不能在裸鼠中成瘤,是在研究人胃腫瘤過程中一種重要的模式係統。

細胞特性

1) 來源:胃

2) 形態:上皮樣,貼壁細胞

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運輸和保存

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式:

(1)幹冰運輸,收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇;

(2)存活細胞,收到後應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

(3)收到細胞後請拍照,3天內如果發現汙染,請及時拍照與绿巨人破解版无敌版聯係。

 

細胞用途:僅供科研使用。

                       

GES-1 人胃黏膜上皮細胞接收後的處理:

1) 收到細胞後,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給绿巨人破解版在线观看。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,酒精消毒瓶壁並將T25瓶置於37℃培養約2-3h。

3) 將T25瓶中的細胞培養基離心後,去上清,添加6ml完全培養基,加入新的T25瓶中繼續培養。

4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.

 

細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM培養基;北美胎牛血清,10%;2 mM glutamine(穀氨酰胺);1 mM pyruvate(丙酮酸鹽); 50 μM 2-mercaptoethanol(巰基乙醇);雙抗,1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存細胞:凍存細胞時,用FBS重懸細胞,然後加入一定量的DMSO,輕輕混合均勻後移入到凍存管中,DMSO終濃度為10%。

二. 細胞處理:

1) 複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養,補加培養基至6ml。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養。

對於貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加入3-4ml此細胞的培養基終止消化。

3. 輕輕吹打後吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,加入1mL培養液後吹勻。

4 . 收到細胞後首次傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,後續傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下麵T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養基後,PBS清洗一遍後加入1-2ml胰酶(含EDTA),細胞變圓脫落後,加入2-3ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和等體積的凍存液,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低於1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置於程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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