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小鼠小膠質BV2原代培養的主要試劑是什麽?

時間:2020-11-24 瀏覽次數:75

  組成中樞神經係統的細胞主要是神經膠質細胞,包括大膠質細胞(星形膠質細胞和少突膠質細胞)和小鼠小膠質BV2。小膠質細胞是中樞神經係統的主要免疫細胞,可呈遞抗原,分泌多種細胞因子,吞噬細胞病原體和壞死組織。它們被認為是大腦中的單核巨噬細胞,由於小膠質細胞在顱內免疫反應中的重要作用,小膠質細胞的研究已成為一個熱點。
  小鼠小膠質BV2的體外培養是研究小膠質細胞功能的重要途徑。在這裏,绿巨人破解版无敌版將整理小鼠小膠質細胞的原代培養。那麽主要試劑是什麽?
 

小鼠小膠質BV2

  1、PBS:PBS粉末,向每個袋中加入ddH2O,使體積達到1000ml,將pH值調節至7.2,高壓滅菌並滅菌。
  2、0.25%胰蛋白酶消化液:使用時濃度為0.25%,含有0.02%EDTA。準備時,將250mg胰蛋白酶和20mgEDTA溶解在100mLPBS溶液中,並在無菌手術台上使用0.22um一次性溶液,通過過濾器過濾,取50ml等分試樣,並保存在4°C下。
  3、接種物的製備:先用DMEM-F12進行90%基礎培養,然後再用10%胎牛血清,後用1%體積分數的雙抗體原液(青黴素+鏈黴素)製成青黴素和鏈黴素元素分別為100U/mL和100U/mL,分別儲存在4℃的冰箱中。
  4、抗生素:將青黴素(800,000U)和鏈黴素(1,000,000U)溶解在無菌手術台中高壓滅菌的雙蒸餾水中。分別加入4ml無菌水/青黴素和5ml無菌水/鏈黴素,分別製成200,000u/ml等分試樣,在-20°C的冰箱中儲存,並在使用前在4°C融化。注意避免反複冷凍和解凍,並使培養基的終濃度為100u/ml。
  5、0.01%L-聚賴氨酸溶液的製備:稱取10mgL-聚賴氨酸溶液,將其溶於100ml無菌去離子水中,過濾並用0.22μm正壓過濾器分裝,在-20℃下儲存。
  6、0.4%錐蟲藍溶液的製備。

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