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人成纖維細胞的分離培養製備方式

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 成纖維細胞屬於由中胚層分化而來的間質細胞。細胞來源於人正常的皮膚組織,成纖維細胞是一種貼壁培養方式的細胞,由於這些細胞非常容易培養,它們已經被廣泛用於細胞和分子生物學研究中。

       一般而言,成纖維細胞能夠分泌I型和III型膠原等細胞外基質,並且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修複時,成纖維細胞由可增殖,可遷移的表型變為有收縮性的,可重塑基質的表型,同時,它們會分泌大量的透明質酸來應對修複時的炎症反應。

       以下是绿巨人全网最好的破解app聚合平台提供的一種人成纖維細胞的製備方式(僅供參考):
       1.首先在分離成纖維細胞時要做到在無菌條件下進行,打開生物安全櫃紫外燈30min作無菌處理。
       2.將手術廢棄的皮膚組織浸泡75%酒精,消毒2min,
       3.將皮膚組織置含P/S的PBS中清洗至少3遍,
       4.然後用眼科剪除去脂肪及結締組織等,
       5.將皮膚剪成0.5*0.5 cm小塊,放入dish中,加0.1%的dispase溶液,封口膜封口,4℃冰箱過夜消化,
       6.第二天,用鑷子將表皮與分開(薄的那層是表皮,厚的那層是),
       7.將剪碎,移至離心管,用0.1%膠原Ⅰ型酶+0.1%膠原Ⅱ型酶+0.1%膠原Ⅳ型酶+ 37℃水浴鍋中消化至少2 h(視消化程度而定),
       8.用100 μm網篩過濾,
       9.取濾液,300 g,離心5 min,
       10.用完全培養基重懸沉澱,
       11.鋪瓶,
       12.隔天換液。
       以上是皮膚成纖維細胞分離培養的一種方式,不同的技術人員分離培養的方法也不同,使用的試劑比例也不盡相同,皮膚成纖維細胞特異性纖維連接蛋白或波形蛋白表達檢測,采用細胞免疫熒光技術。細胞純度可高達於90%,所有的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內操作,並請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟棄。

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